ANTICUERPOS CONJUGADOS CONTRA EL CÁNCER DE MAMA: EVALUACIÓN TÉRMICA Y PROPIEDADES HIDRODINÁMICAS

Abstract

Este trabajo tiene como objetivo el estudio biofísico de distintos anticuerpos que son utilizados para el tratamiento del cáncer de mama positivo para el receptor HER2. Estos son los casos donde hay una sobreexpresión de la proteína HER2, que favorece la proliferación celular descontrolada. Esta enfermedad, al ser una de las que causa más mortalidad en la población, sobre todo en mujeres, requiere de un estudio exhaustivo, y esto incluye conocer las características de los medicamentos que se usan en los tratamientos. Por esa razón se han analizado el anticuerpo monoclonal trastuzumab y dos anticuerpos conjugados, que son los que llevan ligados un fármaco. El objetivo principal es caracterizar y comparar las propiedades hidrodinámicas y la estabilidad térmica de estos anticuerpos, incluyendo su interacción con la proteína HER2. Para realizar el análisis se emplearon dos técnicas. La cromatografía de exclusión por tamaños, con la que se pueden obtener propiedades como el peso molecular o la viscosidad intrínseca de los anticuerpos. También la dispersión de luz dinámica, con la que se obtuvieron datos como son el tamaño hidrodinámico, el coeficiente de difusión o la movilidad electroforética. Los resultados que se obtuvieron para los anticuerpos conjugados fueron un mayor peso molecular respecto del trastuzumab, debido a la presencia de los citotóxicos. En cuanto al tamaño hidrodinámico de los anticuerpos conjugados este fue superior, sobre todo para el trastuzumab unido al citotóxico B. El incremento de tamaño respecto al trastuzumab, se vio reflejado en un menor coeficiente de difusión, indicando una mayor dificultad para ser interiorizados en la célula y una mayor tendencia a la agregación proteína ¿ proteína cuando se encuentran en solución. En el estudio de estabilidad térmica, se sometió a los anticuerpos a distintas temperaturas para analizar qué efectos provocaba, se pudo observar que los anticuerpos conjugados eran más susceptibles a la desnaturalización y agregación a temperaturas elevadas, en comparación con el trastuzumab. Además se realizaron una serie de mezclas entre los anticuerpos conjugados y la proteína HER2, para analizar cuáles eran las interacciones que tenían lugar. Los resultados evidenciaron la formación de complejos 2:1 y 1:1 entre la proteína HER2 y los anticuerpos, lo cual refleja una interacción similar a la que realiza el trastuzumab según la bibliografía. En cuanto al potencial zeta y la movilidad electroforética reflejaron una menor estabilidad los conjugados frente a la aplicación de corrientes eléctricas y las variaciones de concentración, lo que podría afectar su comportamiento en condiciones fisiológicas. Estos hallazgos subrayan la importancia de comprender y optimizar las propiedades fisicoquímicas de los anticuerpos conjugados para mejorar su eficacia clínica y reducir los posibles efectos adversos relacionados con la agregación y la pérdida de funcionalidad.