Estudio de las interacciones de complejos metálicos con actividad anticancerosa con moléculas de interés biológico mediante técnicas electroquímicas

Abstract

En este Proyecto de Fin de Carrera se ha estudiado la síntesis y caracterización de tres compuestos titanoceno (Figura 1) con sustituyentes alquenilo que han sido sintetizados mediante técnicas de Schlenk para asegurar la atmósfera inerte durante todo el proceso de síntesis. Estos compuestos han sido caracterizados mediante resonancia magnética nuclear de protón (1H-RMN) y análisis elemental de carbono e hidrógeno. Todos los compuestos titanoceno tienen un sustituyente alquenilo CMe2CH2CH2CH=CH2 que ha demostrado en trabajos anteriores dotar al complejo de mayor citotoxicidad. Se estudió la actividad citotóxica de estos tres compuestos titanoceno mediante la evaluación de los datos de IC50 obtenidos en ensayos previos y se compararon con los datos de actividad citotóxica del compuesto de referencia [Ti(n5-C5H5)2Cl2] y cisplatino. En general los compuestos titanoceno presentados en este Proyecto de Fin de Carrera muestran menor citotoxicidad que cisplatino y mayor que [Ti(n5-C5H5)2Cl2] en las líneas celulares cancerosas estudiadas. Por último, se analizó la interacción de los compuestos titanoceno 5, 6 y 7 y el compuesto de referencia [Ti(n5-C5H5)2Cl2] con moléculas de interés biológico tales como las bases nitrogenadas citosina y timina, los nucleótidos adenosina y guanosina y ADN de esperma de pez de cadena sencilla mediante la técnica electroquímica de voltametría cíclica. Los ensayos electroquímicos se llevaron a cabo bajo un pH fisiológico de 7.4 a concentraciones de compuesto titanoceno entre 0.1 y 10 mM. La concentración de las moléculas de interés biológico se fue variando de 10 a 50 mM para cada ensayo así también como la velocidad de barrido que se mantuvo entre 100 y 1000 mV/s. Con el software del equipo electroquímico (Autolab GPES) se analizaron los voltamogramas obtenidos y se recogieron los valores de intensidad de pico (Ip) y potencial de pico (Ep) que se utilizaron para obtener, mediante análisis matemático, el coeficiente de difusión, D. Los resultados obtenidos muestran que el compuesto 5 es aquél en el que se observan interacciones más fuertes con estas moléculas. Con el compuesto de referencia [Ti(n5-C5H5)2Cl2] también se observan interacciones con las distintas moléculas estudiadas, aunque al poseer éste una citotoxicidad menor que el resto de compuestos, parece tener también una aplicabilidad biológica menor. Teniendo en cuenta que el ADN es la molécula objetivo biológico de los derivados titanoceno, las técnicas de voltametría cíclica para el estudio de las interacciones de los derivados titanoceno con distintos fragmentos moleculares de ADN parecen un método sencillo y rápido y que nos puede dar una idea general de la citotoxicidad final de los mismos.