Examinando por Autor "García-San Frutos, Miriam"

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Estudio de las señales inflamatorias en relación con la resistencia a insulina desarrollada
(2010-02-17T14:31:12Z) García-San Frutos, Miriam
Los niveles séricos de algunas citoquinas proinflamatorias como IL-1 e IL-6 (objetivo 1) aumentaron significativamente durante el envejecimiento. La expresión de citoquinas en tejido adiposo epididimal y perirrenal (objetivo 2) aumenta significativamente con la edad. Cuando realizamos este análisis en el hígado (objetivo 2 ampliado), pese a que se aprecia un incremento de éstos marcadores con la edad, éste no es tan obvio, y no se hace significativo en varios parámetros incluso a los 24 meses de edad. Estos datos están de acuerdo con nuestros resultados que demuestran que el adiposo muestra señales de resistencia antes que el músculo, mientras que la señal de insulina no parece estar significativamente alterada en hígado a los 24 meses. Es más, la restricción calórica que se ha mostrado eficaz para mejorar la resistencia a insulina, sobretodo en edades no muy avanzadas, también reduce los niveles séricos de citoquinas y la expresión de citoquinas proinflamatorias en tejido adiposo, lo que sugiere una clara relación entre inflamación y resistencia a insulina. Además de estos objetivos alcanzados, hemos observado un aumento de la infiltración de macrófagos (objetivo 3), de fibrosis (objetivo 3 ampliado) y un aumento de la activación basal de vías de señalización relacionadas con la inflamación (objetivo 4) en hígado; habiéndose comenzado estos estudios en adiposo, hipotálamo y músculo.
Fibrosis hepática durante el envejecimiento: respuesta durante una restricción nutricional crónica.
(XXXII CONGRESO DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR., 2009-09-23) Horrillo, Daniel; Carrascosa, Jose María; García-San Frutos, Miriam; Barrús, María Teresa; Ros, Manuel; Fernández-Agulló, Teresa
NTRODUCCIÓN: El envejecimiento en la rata Wistar se asocia a una resistencia central y periférica a insulina que es revertida parcialmente con una restricción calórica. Teniendo en cuenta que la resistencia a insulina se ha asociado también a un estado de inflamación subcrónico en el presente trabajo hemos querido estudiar el estado inflamatorio de hígado durante el envejecimiento y el posible efecto de una restricción nutricional. MATERIAL Y MÉTODOS: Animales: ratas Wistar control de 3 meses y de 8 y 24 meses con y sin restricción nutricional crónica. ELISA para analizar los niveles de citoquinas proinflamatorias plasmáticas. WESTERN BLOT para analizar los niveles de serina quinasas como JNK que se han asociado con estados de resistencia a la insulina. Estudios histológicos para ver la distribución de células de Kupfer, detección de fibrosis mediante histoquímica, inmunohistoquímica utilizando anticuerpos específicos de macrófagos y de células estrelladas. RESULTADOS: De las citoquinas analizadas los niveles de PAI aumentan durante el envejecimiento y son parcialmente restaurados tras una restricción crónica moderada. A nivel histológico el envejecimiento se asocia con un aumento de macrófagos, una redistribución de los mismos y una ligera fibrosis que en otras modelos se ha asociado con un aumento de PAI. JNK y p38 también aumentan durante el envejecimiento. CONCLUSIONES: Durante el envejecimiento en la rata Wistar se observa un aumento en plasma de citoquinas proinflamatorias que en el hígado se asocian a un aumento en la expresión de las vía proinflamatorias, un aumento y redistribución de los macrófagos en el hígado y la aparición de fibrosis. Estos cambios son parcialmente restaurados con una restricción nutricional crónica y moderada.
Impaired Central Insulin Response in Aged Wistar Rats: Role of Adiposity
(Endocrinology, 2007-11-01) García-San Frutos, Miriam; Fernandez-Agullo, Teresa; De Solis, Alain J.; Andres, Antonio; Arribas, Carmen; Carrascosa, Jose M.; Ros, Manuel
Insulin, like leptin, is considered as a lipostatic signal acting at a central level. Aging and age-associated adiposity have been related to the development of leptin resistance in Wistar rats. In the present article, hypothalamic insulin response during aging has been studied in Wistar rats. Thus, the effects of intracerebroventricular infusion of insulin during a week on food intake and body weight as well as insulin signal transduction after acute intracerebroventricular insulin administration have been studied in 3-, 8-, and 24-month-old rats. To explore the possible role of age-associated adiposity, these experiments were also performed in 8- and 24-month-old rats after 3 months of food restriction to reduce visceral adiposity index to values below those of young animals. Intracerebroventricular administration of insulin during a week was more efficient at reducing food intake and body weight in 3-month-old rats than in 8- and 24-month-old rats. Hypothalamic insulin-stimulated insulin receptor, GSK3, AKT, and p70S6K phosphorylation decreased with aging. Insulin receptor and IRS-2 phosphoserine was increased in 24-month-old rats. Food restriction improved both insulin responsiveness and insulin signaling. These data suggest that Wistar rats develop hypothalamic insulin resistance with aging. This can be explained by alterations of the signal transduction pathway. The fact that food restriction improves central insulin response and signal transduction points to the age-associated adiposity as a key player in the development of central insulin resistance.
Implicación de proteínas tirosina fosfatasas (PTP1B) en la disminución de la señal de insulina en el hipotálamo con el envejecimiento: efecto de la restricción nutricional.
(XXXII CONGRESO DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR., 2009-09-23) García-San Frutos, Miriam; Fernández-Agulló, Teresa; Lauzurica, Nuria; Gallardo, Nilda; Andrés, Antonio; Ros, Manuel
Introducción La resistencia a insulina se ha relacionado con un aumento de la expresión y/o actividad de proteínas tirosina fosfatasas, especialmente PTP1B, tanto a nivel central como periférico. Las ratas viejas presentan resistencia central a insulina debido a múltiples alteraciones en su vía de señalización. En este trabajo hemos estudiado el posible papel de las PTPs en la resistencia central a insulina durante el envejecimiento y su relación con la restricción nutricional. Material y métodos En extractos hipotalámicos de ratas Wistar macho de 3 y 24 meses de edad, y de 24 meses sometidas a restricción nutricional crónica se determinó: la actividad fosfatasa total utilizando PNPP y la capacidad de desfosforilar a un péptido fosforilado en tirosina en los sitios de autofosforilación de la cadena [beta] del receptor de insulina mediante el kit PTP assay kit 1; la activación de la PTP1B y su asociación con el receptor de insulina (RI) mediante inmunoprecipitación y western blot. Resultados A pesar de que la actividad fosfatasa total no se modifica en extractos hipotalámicos de ratas viejas, la capacidad de estos extractos para desfosforilar el péptido con la secuencia de autofosforilación en tyr del RI aumentó significativamente en ratas viejas. Además se observó un aumento de la fosforilación en tyr de PTB1B así como de su asociación con el RI en extractos hipotalámicos de ratas viejas. La restricción nutricional crónica ligeramente revirtió estos parámetros. Conclusiones En hipotálamos de animales viejos el aumento de la actividad de la PTP1B y de su asociación con el RI podría estar implicado en la menor capacidad del receptor de insulina para activarse en respuesta a insulina. Estos cambios son parcialmente restaurados con una restricción nutricional.
Involvement of protein tyrosine phosphatases and inflammation in hypothalamus insulin resistance associated with ageing: effect of caloric restriction
(Elsevier, 2012) García-San Frutos, Miriam; Fernández-Agulló, Teresa; Carrascosa, Jose María; Horrillo, Daniel; Barrús, María Teresa; Oliveros, Eva; Sierra, Johanna; Ros, Manuel
Aged Wistar rats present central insulin resistance associated with ageing. Several steps of the insulin signaling pathway have been described to be impaired in aged rats at hypothalamic level. In the present article we have explored possible alterations in protein tyrosine phosphatases (PTPs) involved in insulin receptor dephosphorylation, as well as pro-inflammatory pathways and serine kinases such as inhibitory kappa ß kinase-nuclear factor kappa-B (IKKß-NF¿B), p38 mitogen-activated protein kinase (p38) and protein kinase C ¿ (PKC¿) that may also be involved in insulin signaling decrease during ageing. We detected that ageing brings about a specific increase in insulin receptor PTP activity and PTP1B serine phosphorylation. Increased association of PTP1B and leukocyte common antigen-related tyrosine protein phosphatase (LAR) with insulin receptor was also observed in hypothalamus from aged rats. Besides these mechanisms, increased activation of the IKKß-NF¿B pathway, p38 and PKC¿ serine/threonine kinases were also detected. These data contribute to explain the hypothalamic insulin resistance associated with ageing. Caloric restriction ameliorates most of the effects of ageing on the above mentioned increases in PTPs and serine/threonine kinases activities and points to age-associated adiposity and inflammation as key factors in the development of age-associated insulin resistance.